| 结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法 |
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| 引用本文： | 崔静,黄爱龙,张文露.结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法[J].生物技术通报,2008(3):99-102. |
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| 作者姓名： | 崔静 黄爱龙 张文露 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 通用引物与载体多克隆住点两端序列互补,将目的片段构建入栽体pGEM-T Easy中,利用载体通用引物M13F和M13R结合片段特异引物进行菌液PCR反应.用PCR产物电泳结果来筛选阳性克隆并鉴定目的片段插入方向,同时能有效对短插入片段重组子进行筛选与鉴定.最终以DNA测序结果来验证,与测序结果一致,显示通用引物PCR方法对阳性克隆的筛选和鉴定优于传统酶切和普通PCR鉴定方法,能够弥补传统方法的不足,且简便快速,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段.
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| 关 键 词： | 通用引物PCR 鉴定 插入方向 短插入片段 结合 通用引物 快速 阳性克隆 鉴定方法 Universal Screening Clone Positive Convenient Method 手段 酶切 显示 验证 测序 重组子 插入片段 方向 筛选 结果 |
Rapid and Convenient Method for Positive Clone Screening and Identifying by PCR Using Universal Primers |
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| Cui Jing,Hung Ailong,Zhang Wenlu.Rapid and Convenient Method for Positive Clone Screening and Identifying by PCR Using Universal Primers[J].Biotechnology Bulletin,2008(3):99-102. |
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| Authors: | Cui Jing Hung Ailong Zhang Wenlu |
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