| 侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备 |
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| 引用本文： | 刘金亮,王凤婷,侯春喜,魏毅,张世宏,潘洪玉.侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备[J].生物技术通报,2010(8). |
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| 作者姓名： | 刘金亮 王凤婷 侯春喜 魏毅 张世宏 潘洪玉 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学植物科学学院,长春,130062
2. 吉林大学超分子材料与结构国家重点实验室,长春,130012 |
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| 基金项目： | "十一五"国家科技支撑计划项目，吉林大学博士科研启动基金项目，吉林大学基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 从吉林长春感病辣椒上获得一黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分离物(CMV-CC),根据GenBank中已登录的CMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列设计简并引物,通过RT-PCR的方法克隆到了长度为657 bp的目的片段。序列分析表明,CMV-CC与CMVI组各分离物核苷酸同源性为93.2%-97.9%。根据完整CP基因核苷酸序列构建的系统进化树显示:38个CMV分离物可分为3个组,CMV-CC属于CMV的IB亚组。将CMV-CC CP基因与原核表达载体pET-22b(+)连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达出分子量约27 kD的融合蛋白。表达的融合蛋白经树脂纯化后免疫家兔制备了抗血清。用间接ELISA测定抗血清效价为1/4 096。Western blotting分析表明制备的抗血清对CP有高度特异性,为准确、快速地检测CMV奠定了基础。
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| 关 键 词： | 黄瓜花叶病毒 辣椒 CP基因 序列分析 原核表达 抗血清制备 |
Sequence Analysis,Prokaryotic Expression of CP Gene of Cucumber Mosaic Virus Infecting Pepper and Antiserum Preparation |
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| Liu Jinliang,Wang Fengting,Hou Chunxi,Wei Yi,Zhang Shihong,Pan Hongyu.Sequence Analysis,Prokaryotic Expression of CP Gene of Cucumber Mosaic Virus Infecting Pepper and Antiserum Preparation[J].Biotechnology Bulletin,2010(8). |
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| Authors: | Liu Jinliang Wang Fengting Hou Chunxi Wei Yi Zhang Shihong Pan Hongyu |
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