| 小鼠DEAF1多克隆抗体的制备及应用 |
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| 引用本文： | 朱小慧,盛德乔,康乐,伍仙凤,邵文,刘晓艳.小鼠DEAF1多克隆抗体的制备及应用[J].生物技术通报,2014(5). |
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| 作者姓名： | 朱小慧 盛德乔 康乐 伍仙凤 邵文 刘晓艳 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81172788);宜昌市科学技术研究与开发项目(A01301-01);湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划(T201203) |
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| 摘 要： | 为研究DEAF1在小鼠胰淋巴结中的内源性表达及调控外周组织抗原基因表达的机制,将DEAF1的原核表达质粒转化至E.coli BL21中,诱导获得重组DEAF1蛋白;经尿素梯度裂解包涵体纯化获得的重组DEAF1蛋白分期免疫Balb/C小鼠,获取鼠抗DEAF1的多克隆抗血清;采用ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫沉淀分别鉴定其效价、特异性、敏感性和亲和力。结果表明,抗血清可与抗原发生特异性的免疫反应,可用于检测DEAF1的表达及荧光定位,抗血清与抗原有较高的亲和力。结果证明所制备的多克隆抗血清具有较高的特异性、敏感性和亲和力。
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| 关 键 词： | 原核表达纯化 DEAF 动物免疫 抗血清 抗体鉴定 |
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