磁珠富集法分离刀鲚微卫星标记 |
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引用本文: | 邓平平,施永海,张根玉,张之文,张海明,陆根海,刘永士.磁珠富集法分离刀鲚微卫星标记[J].生物技术通报,2014(6). |
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作者姓名: | 邓平平 施永海 张根玉 张之文 张海明 陆根海 刘永士 |
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作者单位: | 上海市水产研究所; |
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基金项目: | 上海市科委重点科技公关项目(11391901300);科技部与上海市共同重大任务科研专项(12dz1909302) |
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摘 要: | 利用磁珠富集法分离微卫星序列,以开发长江刀鲚微卫星分子标记。将长江刀鲚基因组DNA经限制内切酶Mse I酶切,回收400-1 000 bp片段,安装接头,构建长江刀鲚全基因组PCR文库。用生物素标记的微卫星探针(CA)12与其杂交,磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段。将洗脱所得片段进行PCR扩增,然后进行克隆。经过菌落PCR检验后挑选出118个阳性克隆进行测序,其中97条含有微卫星序列。用设计合成59对微卫星引物对30尾养殖长江刀鲚进行引物的多态性筛选,得到9对多态性引物。
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关 键 词: | 刀鲚 磁珠富集 微卫星 多态性 |
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