磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备 |
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引用本文: | 程华,方向东,吴萌,史蕾,崔硕.磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备[J].生物技术通报,2014(3). |
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作者姓名: | 程华 方向东 吴萌 史蕾 崔硕 |
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作者单位: | 河北省科学院生物研究所;中国科学院北京基因组研究所;河北师范大学生命科学学院; |
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基金项目: | 河北省科学院科技攻关项目(13335) |
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摘 要: | 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是一个肝癌潜在的诊断标志物和治疗靶点。为获得抗GPC3单克隆抗体,用PCR方法克隆GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入pGEX-2T载体,构建了pGEX-2T-gpc3表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,获得高效表达。经纯化后获得分子量为58 kD的蛋白。以该重组蛋白为免疫原,通过免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和筛选获得1株抗该重组蛋白的单克隆抗体1F3。Western blot分析显示,该抗体具有较好的特性,可用于GPC3蛋白的功能和应用研究。
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关 键 词: | 磷脂酰肌醇蛋白聚糖 蛋白表达 单克隆抗体 |
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