| 携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 程莉,袁成福,黄秀凝,卜友泉,易发平,刘革力,汪长东,宋方洲.携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定[J].生物技术通报,2009(9). |
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| 作者姓名： | 程莉 袁成福 黄秀凝 卜友泉 易发平 刘革力 汪长东 宋方洲 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，教育部博士点基金资助项目，重庆市科委自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响.将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1 mRNA和蛋白表达的变化.重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblotting检测人NFBD1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1 mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 逆转录病毒载体 NFBD1基因 宫颈癌 |
Construction and Identification of Recombinant Retrovirus Vector Expressing shRNA Targeting Human NFBD1 Gene |
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| Cheng Li,Yuan Chengfu,Huang Xiuning,Bu Youquan,Yi Faping,Liu Geli,Wang Changdong,Song Fangzhou.Construction and Identification of Recombinant Retrovirus Vector Expressing shRNA Targeting Human NFBD1 Gene[J].Biotechnology Bulletin,2009(9). |
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| Authors: | Cheng Li Yuan Chengfu Huang Xiuning Bu Youquan Yi Faping Liu Geli Wang Changdong Song Fangzhou |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | shRNA |
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