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离子注入法将外源DNA直接导入小麦的研究
引用本文:吴丽芳,尹若春,谷运红,吴李君,余增亮.离子注入法将外源DNA直接导入小麦的研究[J].生物物理学报,2001,17(4):724-730.
作者姓名:吴丽芳  尹若春  谷运红  吴李君  余增亮
作者单位:1. 中国科学院等离子体物理研究所离子束生物工程学实验室,安徽,合肥,230031
2. 安徽大学生命科学学院生物技术系,安徽,合肥,230039
基金项目:国家重点科技攻关项目(96-538 02-01)资助课题,安徽省自然科学基金资助项目(99047640)
摘    要:通过离子束介导法将外源GUS基因直接导入小麦成熟种子.组织化学染色结果表明GUS基因的瞬时表达率可以达到70%以上.当代(Ru)PCR分析结果表明,阳性植株的频率与离子注入剂量有关,适宜的注入剂量为7×106离子/cm2.PCR-Southern和Southern B1ot分析结果表明外源基因已整合到小麦基因组中,说明离子束介导外源DNA直接导入小麦是可行的.另外还探讨了用离子束介导创造小麦远缘分子杂种的可能性.

关 键 词:离子注入  GUS基因  小麦  直接导入  成熟种子  外源DNA
文章编号:1000-6737(2001)04-0724-07
修稿时间:2001年5月14日

STUDIES ON INTRODUCING EXOGENOUS DNA INTOWHEAT BY ION IMPLANTATION
WU Li-fang,YIN Ruo-chun,GU Yun-hong,WU Li-jun,YU Zeng-liang.STUDIES ON INTRODUCING EXOGENOUS DNA INTOWHEAT BY ION IMPLANTATION[J].Acta Biophysica Sinica,2001,17(4):724-730.
Authors:WU Li-fang  YIN Ruo-chun  GU Yun-hong  WU Li-jun  YU Zeng-liang
Institution:WU Li-fang1,YIN Ruo-chun2,GU Yun-hong1,WU Li-jun1,YU Zeng-liang1
Abstract:The exogenous GUS gene was introduced into wheat mature seeds by ion implantation. Histochemical staining showed the temporary expression rate of GUS gene reached more than 70%. PCR assays of R0 generation displayed that the positive plant rate was related to dosage of implanted ions, and the suitable dosage for transformation was 7×1016ions/cm2. Further PCR-Southern and Southern blot assays proved that exogenous gene had integrated into wheat genome. The experiments provided an effective method for DNA delivery into wheat and showed a good prospect of introducing exogenous genomic DNA with helpful gene into wheat.
Keywords:Ion implantation  GUS gene  Wheat  Direct delivery  Mature seeds
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