棉花中一个类DREB1/CBF基因(GhDREB1L)的分子克隆及其功能分析 |
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引用本文: | 黄波,金龙国,刘进元.棉花中一个类DREB1/CBF基因(GhDREB1L)的分子克隆及其功能分析[J].中国科学C辑,2006,36(5):390-397. |
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作者姓名: | 黄波 金龙国 刘进元 |
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作者单位: | 清华大学生物科学与技术系,分子生物学实验室及教育部蛋白质科学重点实验室,北京,100084 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划);国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金 |
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摘 要: | DREB1/CBF类转录因子在植物抵抗外界环境胁迫上起到非常重要的作用, 而且对于利用基因工程技术来提高植物的抗逆性也非常有用. 从棉花中分离出一个编码DREB1/CBF类蛋白(GhDREB1L)的cDNA, 并对该蛋白质的序列特性、DNA结合特性及转录本的表达特征进行了分析. GhDREB1L含有一个保守的AP2/ERF结构域, 其氨基酸序列与其他植物中DREB家族的DREB1/CBF组成员高度相似. 采用Ni-NTA亲和层析技术, 成功纯化了在BL21 (DE3)菌株中表达的GhDREB1L蛋白的DNA结合区. 凝胶滞留实验揭示, 纯化的GhDREB1L融合蛋白能够特异性地与已经得到鉴定的DRE元件(核心区, ACCGAC)以及胚胎发育晚期丰富蛋白基因LEA D113启动子区中的类DRE元件(核心区, GCCGAC)结合. 半定量RT-PCR显示GhDREB1L基因在棉花子叶中受到低温、干旱以及NaCl处理的诱导. 这些结果暗示了棉花GhDREB1L转录因子可能是通过与DRE元件的结合, 在低温、干旱及高盐的应答途径中起重要作用.
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关 键 词: | DREB1/CBF 低温 干旱 LEA D113 棉花 |
收稿时间: | 2006-04-04 |
修稿时间: | 2006年4月4日 |
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