抗腺苷酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 王锡德,周筠梅,郭振泉.抗腺苷酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国科学C辑,1997,27(6):537. |
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作者姓名: | 王锡德 周筠梅 郭振泉 |
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作者单位: | 1.中国科学院生物物理研究所 生物大分子国家重点实验室,北京100101 2.北京大学生命科学学院 北京100871 |
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摘 要: | 克隆了6株稳定分泌抗腺苷酸激酶(Adenylate kinase,AK)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并鉴定或测定了其中3株细胞所分泌抗体的亚型和分子量.通过测定抗体和固相及均相抗原的结合能力,发现McAb3D3与固定化及溶液中腺苷酸激酶的亲和常数分别为8.4×108和7.0×10~4(mol·L-1)-1,而McAb4D8与固定化及溶液中腺苷酸激酶的亲和常数分别为9.6×108和3.9×106(mol·L.1)-1McAb3D3和McAb4D8与不同存在形式抗原之间亲和常数如此大的差别,说明这2个抗体更适合与固定化腺苷酸激酶的结合.由于蛋白质分子常因吸附在酶标板上而发生部分变性,所以用间接ELISA方法筛选出的单克隆抗体McAb3D3和McAb4D8可能是针对部分变性腺苷酸激酶分子的.这2种抗腺苷酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定为我们进一步将其用于蛋白质折叠机制的研究奠定了基础.
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关 键 词: | 腺苷酸激酶 单克隆抗体 混合抗原 固相亲和常数 均相亲和常数 |
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