| 登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点的研究 |
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| 引用本文： | 赵卫,范宝昌,胡志君,陈水平,王鹏程,苑锡同,李晓萸,于曼,秦鄂德,杨佩英.登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点的研究[J].中国科学C辑,2002,32(6):552-558. |
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| 作者姓名： | 赵卫 范宝昌 胡志君 陈水平 王鹏程 苑锡同 李晓萸 于曼 秦鄂德 杨佩英 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(批准号:30000144) |
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| 摘 要： | pDVWS501为含有登革2型病毒全长cDNA的质粒, 可利用感染性转录体技术恢复为有活力的病毒MON501. 将MON501注射乳鼠脑内可引发脑炎症状, 其E蛋白的62, 203位分别为Glu, Asn. 采用OL-PCR方法把pDVWS501 E62位氨基酸突变为Lys, 得到质粒TB62; E203位氨基酸突变为Asp, 得到质粒TB203. 将pDVWS501, TB62和TB203酶切后体外转录得到全长登革2型病毒转录体, 应用电穿孔技术转染BHK-21细胞, 7天后收毒. RT-PCR证实有登革2型病毒存在, 接种C6/36细胞, 3~5 d可使其产生典型病变. 测定突变区域的序列, 结果表明得到了恢复病毒MON501和E62, E203位点突变的重组病毒HFT62, HFT203. 3株病毒均在其基因组5′端加“G”, 3′端则与登革2型病毒野生株相同. 分别将3株病毒稀释至105~ 102 TCID50, 经脑内途径注射1日龄乳鼠, 发现与MON501相比, HFT62, HFT203在同一稀释度发病乳鼠的个数减少, 发病时间延长且差异显著, 表明E62, E203可能是登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点.
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| 关 键 词： | 毒力相关位点 感染性转录体 点突变 登革2型病毒 |
| 收稿时间： | 2002-02-25 |
| 修稿时间： | 2002年2月25日 |
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