低分子量透明质酸片段通过toll样受体4信号途径激活枯否细胞

高分子量透明质酸（high-molecular-weight hyaluronic acid，HMW-HA）是重要的肝脏基质，分子量高达2×10^6Da以上，可被活性氧分子（reactive oxygen species，ROS）等降解成低分子量透明质酸片段（hyaluronic acid fragments，HA fragments），后者能被toll样受体4（toll-like receptor4，TLR4）识别并激活免疫细胞诱发炎症反应。基于枯否细胞表达TLR4，推测HA fragments通过激活枯否细胞TLR4信号系统而启动肝脏缺血再灌注损伤。从TLR4基因突变型（C3H／HeJ，TLR4^Mut/Mut）及野生型（C3H／HeN，TLR4^＋/＋）小鼠分离肝脏枯否细胞常规培养，用酶降解及色谱柱分离方法制备HA fragments，观察HMW-HA及HA fragments激活枯否细胞的差异，检测培养上清肿瘤坏死因子-α或白介素-1β水平变化；枯否细胞p38MAPK信号通路的活化；用特异性p38MAPK阻断剂—SB-203580，阻断p38MAPK活化后，观察培养上清中肿瘤坏死因子-α或白介素-1β水平变化。结果显示HA fragments可以促进TLR4^＋/＋枯否细胞分泌促炎因子，不能诱导TLR4^Mut/Mut枯否细胞分泌促炎因子。而HMW-HA既不能促进TLR4^＋/＋枯否细胞也不能促进TLR4^Mut/Mut枯否细胞分泌促炎因子。采用多黏菌素中和脂多糖后，HA fragments促进TLR4^＋/＋枯否细胞分泌促炎因子的能力不变，这一过程伴随p38MAPK信号通路的活化。当运用p38MAPK信号通路的特异性阻断剂SB-203580，抑制p38MAPK活性时，HA fragments促进TLR4^＋/＋枯否细胞分泌促炎因子的能力显著下降。因此与基质组成成分HMW-HA不同，HA fragments可以通过TLR4激活枯否细胞，促进其分泌促炎因子诱发炎症反应，这一过程依赖于p38MAPK的激活。