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| 绵羊胎儿成纤维细胞不同处理对核移植重构胚发育的影响 | |
| 引用本文： | 王海,敖红,潘求真,李荣旗,赵孟彬,连正兴,李宁,吴常信.绵羊胎儿成纤维细胞不同处理对核移植重构胚发育的影响[J].中国科学C辑,2006,36(5):398-404. |
| 作者姓名： | 王海 敖红 潘求真 李荣旗 赵孟彬 连正兴 李宁 吴常信 |
| 作者单位： | 1. 中国科学院动物研究所,北京,100080;中国农业大学动物科技学院,北京,100094 2. 中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094 3. 东北农业大学,哈尔滨,150030;中国农业大学动物科技学院,北京,100094 4. 北京锦绣大地农业股份有限公司,北京,100049 5. 中国农业大学动物科技学院,北京,100094;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094 6. 中国农业大学动物科技学院,北京,100094 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划);农业部农业结构调整技术研究专项基金 |
| 摘 要： | 研究供体细胞代数、大小、周期以及基因转染处理对重构胚发育的影响. 结果如下: (i)体外培养5~7代细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率显著高于16~18代细胞的桑椹/囊胚率(17.3% vs. 4.9%, P < 0.05); (ii) 15~25 μm细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率为20.0%, 高于8~15 mm细胞、25~33 μm细胞桑椹/囊胚率(8.0%, 9.7%), 但效果不显著(P > 0.05); (iii) 血清饥饿与非血清饥饿的细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚发育率没有显著性差异(11.8% vs. 18.6%, P > 0.05), 但非血清饥饿的效果要好于血清饥饿; (iv) 用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞效果最好, 重构胚的桑椹/囊胚率可达27.5%, 而未处理或用0.1 μmol/L秋水仙素处理供体细胞, 重构胚的桑椹/囊胚率分别为17.1%和12.1%, 但三者之间差异不显著(P > 0.05); (v) 以转染绿色荧光蛋白基因(GFP)细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率显著低于非转基因细胞做供体核的桑椹/囊胚率(3.1% vs. 20.4%, P < 0.05). 上述结果表明, 传代少、中等大小的细胞更适合做供体核; 血清饥饿没有必要; 用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞有利于重构胚的发育; 转基因供体细胞对重构胚发育有影响. |
| 关 键 词： | 胎儿成纤维细胞 核移植 秋水仙素 血清饥饿 绿色荧光蛋白基因(GFP) 绵羊 |
| 收稿时间： | 2006-01-07 |
| 修稿时间： | 2006年1月7日 |
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