| 转基因水稻中转录水平cry1Ab 基因的沉默及其阶段复活 |
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| 引用本文： | 吴刚,崔海瑞 舒庆尧 叶恭银 夏英武 高明尉 I. Altosaar 李毅.转基因水稻中转录水平cry1Ab 基因的沉默及其阶段复活[J].中国科学C辑,2001,31(6):487-496. |
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| 作者姓名： | 吴刚 崔海瑞 舒庆尧 叶恭银 夏英武 高明尉 I. Altosaar 李毅 |
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| 作者单位： | 吴刚（浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029;北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北大-耶鲁植物分子遗传学与农业生物技术联合中心,北京,100871）
崔海瑞（浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029）
舒庆尧（浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029）
叶恭银（浙江大学植物保护系,杭州,310029）
夏英武（浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029）
高明尉（浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029）
I.Altosaar（Department of Biochemistry,Microbiology andImmunology,University of Ottawa,K1N 6N5.Canada）
李毅（北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北大-耶鲁植物分子遗传学与农业生物技术联合中心,北京,100871） |
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| 基金项目： | 美国洛克菲勒基金(批准号:2000FS020和RF9900l#374)和霍英东高校青年教师基金(批准号:71025)资助项目 |
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| 摘 要： | 以田间环境释放条件下农杆菌介导法转化而成的转cry1Ab 基因水稻为研究对象, 利用GUS组织化学染色法、Western杂交技术, 在不抗虫转基因中8215株系后代中筛选到一个无cry1Ab 蛋白表达产物株系. 分子杂交结果证实, 转基因cry1Ab 在中8215株系后代中发生了转录水平沉默, 整合过程中基因重排使两个拷贝的ubiquitin启动子同时插入到水稻基因组中. 甲基化分析证实ubiquitin启动子区域发生了甲基化, 从而导致cry1Ab基因沉默. 利用去甲基化试剂5-氮胞苷处理转基因沉默水稻种子, 并在苗期、分蘖期、孕穗期、灌浆期及成熟期检测了其对沉默基因的复活效应, 结果表明：5-氮胞苷处理使沉默的cry1Ab 基因在灌浆期恢复表达活性, 复活率约为8%~30%, 且以低浓度(45 mg/L处理1, 2 d)处理的复活率及恢复表达水平较高, 复活基因表达的cry1Ab 蛋白最高可达可溶性总蛋白的0.147%.
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| 关 键 词： | cry1Ab 基因 沉默 复活 转基因水稻 |
| 收稿时间： | 2001-02-12 |
| 修稿时间： | 2001年2月12日 |
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