| 温敏核不育水稻5460S细菌人工染色体文库的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 邱芳,金德敏,伏健民,张超良,谢纬武,杨仁崔,张洪斌,王斌.温敏核不育水稻5460S细菌人工染色体文库的构建和鉴定[J].中国科学C辑,1999,29(5):518-1. |
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| 作者姓名： | 邱芳 金德敏 伏健民 张超良 谢纬武 杨仁崔 张洪斌 王斌 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院遗传研究所,北京,100101
2. 福建农业大学作物遗传育种研究所,福州,350002
3. Department of Soil and Crop Sciences, Texas A & M University, Texas, USA |
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| 基金项目： | 国家科技攻关项目，美国洛克菲勒兄弟基金会资助项目 |
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| 摘 要： | 为了构建温敏核不育 (TGMS)基因区域的精细物理图谱并最终分离TGMS基因 ,以温敏核不育水稻 5 46 0S为材料 ,摸索优化了构建植物细菌人工染色体 (BAC)文库的方法 ,构建了一个高质量的BAC文库 .该文库由 1 95 84个克隆构成 ,插入片段平均长度为 1 1 0kb ,相当于水稻单倍体基因组大小的 5倍 ;以分子量分别为 1 40和2 5 0kb的 2个大BAC克隆进行稳定性传代实验 ,经 1 0 0代传代后其插入的DNA片段仍然稳定存在 ;以线粒体和叶绿体基因为探针筛选BAC文库 ,未检验出叶绿体和线粒体DNA的污染 ;以和tms1基因连锁的 3个分子标记作为探针对BAC文库进行了筛选 ,每个探针至少可获得一个阳性克隆 ,利用热不对称性交错PCR(Tail PCR)法成功分离了阳性克隆的左右末端序列 .
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| 关 键 词： | 水稻 温敏核不育基因 细菌人工染色体文库 热不对称性交错PCR |
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