一个含WD结构域蛋白的基因在鱼类卵子发生过程中的差异表达及其特征分析 |
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引用本文: | 文建军,谢京,刘世贵,桂建芳.一个含WD结构域蛋白的基因在鱼类卵子发生过程中的差异表达及其特征分析[J].中国科学C辑,2001,31(4):343-352. |
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作者姓名: | 文建军 谢京 刘世贵 桂建芳 |
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作者单位: | 1. 四川大学生命科学学院 2. 中国科学院水生生物研究所淡水生态和 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(批准号:30070402)、国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999053908)和淡水生态与生物技术国家重点实验室开放基金(批准号:2000FB06)资助项目**联系人,E-mail:jfgui@ihb |
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摘 要: | 用抑制性差减杂交结合SMART cDNA合成和RACE-PCR技术的综合方法,从鱼类卵母细胞卵黄形成后期差减文库中克隆到一个新的含WD结构域蛋白的基因.该基因cDNA全长为1870bp,可读框长990bp,编码的蛋白质由329个氨基酸组成,含有6个WD结构域;5′非编码区长210bp,3′非编码区长670bp,有脊椎动物典型的ANNATG起始序列和polyA加尾信号AATAAA.由于其编码的蛋白质与STRAP蛋白(serine-threonine kinase receptor- associated protein)有92%的同源性,所以把它称为FSTRAP (fish STRAP).虚拟Northern杂交表明,FSTRAP在卵母细胞的卵黄形成后期表达,而在卵黄形成前期(Ⅰ时相卵母细胞)不表达.各种组织的RT-PCR显示,FSTRAP在脑、心、肾、肌肉、卵巢、脾和精巢有转录,而在肝脏中未见扩增带.不同发育时相卵母细胞的RT-PCR表明, FSTRAP在第Ⅱ~Ⅴ时相都有转录.Western杂交也显示FSTRAP在除肝组织外的多种组织中都表达,与RT-PCR结果相同,FSTRAP在卵黄形成前期几乎不表达,从第Ⅱ时相开始表达,且与其转录水平一致.
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关 键 词: | 卵母细胞 卵子发生 抑制性差减杂交 WD结构域 银鲫 |
收稿时间: | 2000-11-01 |
修稿时间: | 2000年11月1日 |
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