水稻Rac家族新成员osRACB基因的克隆及结构分析 |
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引用本文: | 罗敏,米志勇,曲红,唐朝荣,梁卫红,吴乃虎.水稻Rac家族新成员osRACB基因的克隆及结构分析[J].中国科学C辑,2003,33(3):202-214. |
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作者姓名: | 罗敏 米志勇 曲红 唐朝荣 梁卫红 吴乃虎 |
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作者单位: | 1. 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100080 2. 北京大学生命科学学院,北京,100871 |
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基金项目: | 科学技术部转基因植物研究与产业化专项资助项目(批准号:J00-A-005) |
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摘 要: | Rac基因是植物中惟一的一类分布广泛的信号GTP结合蛋白, 它在整个植物生长发育过程中起着极为重要的作用. 应用本实验室已有的水稻光周期育性转换相关基因osRACD为探针, 在低严谨杂交条件下, 筛选农垦58N-LD雌雄蕊形成期(第Ⅳ期)幼穗cDNA文库, 获得一水稻Rac家族新基因. 经同源性比较和序列分析显示, 该基因与玉米Rac家族成员RACB基因具有93%的核苷酸同源性, 且两者氨基酸序列长度相等, 仅存在一个氨基酸残基差异, 故命名新基因为osRACD. 进一步应用PCR技术, 以农垦58N基因组DNA为模板扩增得到长度为2930 bp的osRACB基因转录区核苷酸序列, 其结构包含7个外显子和6个内含子, 同时, 通过基因组文库筛选获得osRACB基因的启动区序列. Southern杂交分析表明osRACB基因同其他Rac基因相似, 是低拷贝基因. RT-PCR检测显示osRACB基因在水稻根、茎、叶中均有一定的表达, 但在茎中表达量最高. 此外, 还以人Rac1蛋白为模板, 利用InsightII软件包下的Homology, Discover等模块对osRACB蛋白进行了三级结构预测.
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关 键 词: | Rac家族 基因克隆 osRACB 水稻 |
收稿时间: | 2002-07-26 |
修稿时间: | 2002年7月26日 |
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