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中华鲟生长激素受体的分子克隆和功能分析
引用本文:廖志勇,吴明江,陈晓丽.中华鲟生长激素受体的分子克隆和功能分析[J].中国科学C辑,2009,39(11):1069-1079.
作者姓名:廖志勇  吴明江  陈晓丽
作者单位:① 温州大学生命与环境科学学院, 温州 325035; ② 首都儿科研究所, 北京 100020
基金项目:国家自然科学基金(批准号: 30460036)、北京市自然科学基金(批准号: 5062014)和江西省自然科学基金(批准号: 0630078)资助项目
摘    要:为研究生长激素对中华鲟生长的调控机制,克隆了中华鲟生长激素受体cDNA.csGHRcDNA的可读框编码了611个氨基酸残基的跨膜蛋白质,含有GHR的所有特征结构域.序列对比发现其他种属GHR中高度保守的氨基酸残基在csGHR中发生了替换.我们利用CHO细胞分析了csGHR的生物功能和csGHR分子中高度保守性氨基酸残基替换的生物意义.csGHR稳定表达细胞中共转染的受丝氨酸蛋白酶抑制剂2.1(Spi1.2)启动子驱动的荧光素酶报告基因受海鲤生长激素(seabream GH,sbGH)诱导表达,并且sbGH诱导稳定表达细胞显著增殖.csGHR稳定表达细胞培养液中检测到中华鲟生长激素结合蛋白质,并且csGHBP的生成需要金属蛋白酶活性的参与.csGHR配体结合域的Asp突变为Glu显著提高csGHR介导的上述生物活性,而Asp突变为Ala则明显降低csGHR的生物活性.这些结果表明,克隆的csGHR具有完全生物功能,并且csGHBP可能通过csGHR蛋白酶解而生成.这些发现将有助于全面了解中华鲟生长调控机制.

关 键 词:中华鲟  生长激素受体  生长激素结合蛋白质  克隆  突变
收稿时间:2009-04-08
修稿时间:2009-05-27
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