鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估 |
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引用本文: | 陈平,张丽军,李选文,王细娥,曹锐,刘珍,熊继先,彭霞,魏颖娟,银兴峰,王贤纯,梁宋平.鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估[J].中国科学C辑,2007,37(6):601-608. |
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作者姓名: | 陈平 张丽军 李选文 王细娥 曹锐 刘珍 熊继先 彭霞 魏颖娟 银兴峰 王贤纯 梁宋平 |
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作者单位: | 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081 |
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基金项目: | 中国人类肝脏蛋白质组计划(CNHLPP);湖南省教育厅科研项目;湖南省科技厅研究课题 |
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摘 要: | 细胞质膜是细胞中重要的细胞器, 在肝功能的发挥中具有非常重要的作用. 使用蔗糖密度梯度离心纯化细胞质膜, 通过电子显微镜观察和免疫印迹法检验膜的纯度. 结果显示, 与组织匀浆成分相比, 质膜富集了20倍, 线粒体的污染减少了约50%. 提取的蛋白质用二/一维凝胶电泳(2DE/1DE)分离、胰酶酶解、电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定, 或者提取的蛋白质直接进行溶液内酶解、液相色谱串联电喷雾离子阱质谱(LC-LTQ)(鸟枪法)鉴定. 一共鉴定了547个非冗余蛋白质, 其中34%为质膜或质膜相关蛋白质. 优化和评估了质膜蛋白质组研究的方法, 且对鼠肝质膜蛋白质组进行了系统的分析.
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关 键 词: | 细胞质膜 蛋白质组 质谱 2DE 鸟枪法 1DE 肝 |
收稿时间: | 2007-06-01 |
修稿时间: | 2007年6月1日 |
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