马立克氏病病毒pp38/pp24聚合体结构及其对pp38基因上游双向启动子活性的影响 |
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引用本文: | 丁家波,崔治中,姜世金,李延鹏.马立克氏病病毒pp38/pp24聚合体结构及其对pp38基因上游双向启动子活性的影响[J].中国科学C辑,2008,38(8):760-765. |
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作者姓名: | 丁家波 崔治中 姜世金 李延鹏 |
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作者单位: | 中国兽医药品监察所 北京100081(丁家波),山东农业大学动物科技学院 泰安271018(崔治中,姜世金,李延鹏) |
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基金项目: | 国家自然科学青年基金(批准号: 30700596)和国家自然科学基金(批准号: 30070544)资助项目 |
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摘 要: | 前期以氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性为指标的研究证明了,马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)的pp38和pp24的同时表达可显著增强基因组中pp38基因与1.8kb mRNA转录子之间双向启动子的转录活性.本研究又以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达水平作为pp38基因上游双向启动转录活性的标志,更直观地证明了只有当同一细胞内同时表达pp38和pp24时,该启动子活性才有完整的启动活性.为了证明这两个蛋白能否相结合,分别以单独表达pp38或pp24的重组质粒pcDNA-pp38或pcDNA-pp24及能同时表达这两个基因的重组质粒pBud-pp38-pp24质粒转染鸡胚成纤维细胞(CEF),用pp38特异的单克隆抗体H19对转染细胞的裂解标记物进行免疫沉淀实验.结果表明,H19可沉淀pp38,但pp24只是在pp38同时存在时才被H19沉淀,而在pcDNA-pp24单独转染的处理样品中不能显示pp24的条带.这证明了,pp24是通过与pp38的结合而被共沉淀下来的,显示pp24和pp38在天然状态下可以形成异二聚体或多聚体.上述两个独立的实验结果表明,pp38和pp24是以聚合体的形式结合于该双向启动子发挥作用的.
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关 键 词: | 马立克氏病病毒 (Marek’s DISEASE VIRUS MDV) pp38/pp24 聚合体双向启动子 |
收稿时间: | 2007-11-20 |
修稿时间: | 2008-05-15 |
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