| 黑曲霉T21 glaA 5′上游调控区DNA与蛋白因子的相互作用分析 |
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| 引用本文： | 仇润祥,朱兴国,刘丽,唐国敏.黑曲霉T21 glaA 5′上游调控区DNA与蛋白因子的相互作用分析[J].中国科学C辑,2002,32(2):122-130. |
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| 作者姓名： | 仇润祥 朱兴国 刘丽 唐国敏 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所,北京,100080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(批准号:39870015) |
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| 摘 要： | 以糖化酶生产菌株黑曲霉T21(Aspergillus niger T21)的糖化酶基因(glaA)5′cis调控区片段为探针, 采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法,从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与glaA 5′调控区特异结合的蛋白因子,并把其结合DNA定位在T21 glaA 5′调控区的-374~ -344,-484~-414以及-580~-540 bp 3个区段, 且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争, 表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合. 以-374~-344 bp序列为探针的紫外交联实验表明, 该蛋白因子的分子量(或亚基分子量)约为10 ku. 利用DNaseⅠ足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位, 并对其结合序列的特性进行了分析.
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| 关 键 词： | 电泳迁移率变动分析 蛋白结合因子 DNaseⅠ足印分析 黑曲霉糖化酶 |
| 收稿时间： | 2001-03-21 |
| 修稿时间： | 2001年3月21日 |
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