长白落叶松转录因子LobHLH34克隆及表达分析

为了解转录因子bHLH在长白落叶松（Larix olgensis）中的功能，探究该基因在长白落叶松不同组织中及不同逆境胁迫下的表达特性，从长白落叶松根、茎和叶3个不同部位的转录组数据中获得bHLH34基因全长序列，并设计引物，克隆得到长白落叶松bHLH34基因，其完整的开放阅读框（ORF）长度为696 bp，共编码231个氨基酸。构建亚细胞定位表达载体，瞬时转化毛果杨（Populus trichocarpa）原生质体，在激光共聚焦显微镜下观察显示，LobHLH34基因定位在细胞核内。系统进化树分析结果显示，长白落叶松与云杉（Picea asperata）、卷柏（Selaginella tamariscina）树种该基因的亲缘关系较近。利用qRT-PCR技术分析了bHLH34基因在长白落叶松中的组织表达特异性和应对非生物胁迫的表达。结果表明LobHLH34基因在长白落叶松的根、茎、叶中均有表达，其中在茎部表达量最低，在叶中相对表达量最高。LobHLH34基因在NaCl、PEG和ABA处理时，不同器官中的表达量也有所不同。推测长白落叶松bHLH34基因参与了植物的生长、发育、响应逆境胁迫的过程，且在不同器官中具有特异性。