| 金花茶查尔酮合成酶基因CnCHS的克隆及遗传转化研究 |
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| 引用本文： | 周兴文,李纪元,朱宇林.金花茶查尔酮合成酶基因CnCHS的克隆及遗传转化研究[J].植物研究,2015(3):327-332. |
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| 作者姓名： | 周兴文 李纪元 朱宇林 |
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| 作者单位： | 玉林师范学院生命科学与技术学院;中国林业科学研究院亚热带林业研究所 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金项目(2012GXNSFBA053077);国家自然科学基金项目(31360197);广西高校科研一般项目(201203YB155);玉林师范学院高层次人才科研启动基金项目(G20120027) |
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| 摘 要： | 根据已发表的金花茶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因(CnCHS)序列设计全长扩增引物,以金花茶花瓣总cDNA为模板进行PCR扩增,成功获得了该基因cDNA全长。将扩增所得全长产物连接PMD18-T载体后转化大肠杆菌E.coli DH5α,提取质粒后经酶切、测序鉴定后,将其与双元表达载体pCAMBIA1300连接,成功构建了CnCHS基因的正义表达载体pCAM-CnCHS。将该重组表达载体转化农杆菌EHA105后,利用农杆菌介导法将CnCHS基因转入烟草,获得转基因烟草18株。利用PCR法及Southern blotting对所获得的转基因植株进行鉴定,结果显示CnCHS基因成功整合到烟草基因组中,阳性率达67%,并获得了单拷贝转基因植株。这些结果表明本研究成功构建了金花茶CnCHS基因对烟草的遗传转化体系,为深入研究CnCHS基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。
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| 关 键 词： | 金花茶 查尔酮合成酶 表达载体 转基因植株 |
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