| 鲤鱼硒蛋白W基因的克隆、序列分析及其组织表达 |
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| 引用本文： | 陈文波,董海燕,张珍,蒋晓雪.鲤鱼硒蛋白W基因的克隆、序列分析及其组织表达[J].四川动物,2014(6). |
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| 作者姓名： | 陈文波 董海燕 张珍 蒋晓雪 |
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| 作者单位： | 河南理工大学资源环境学院;湖州师范学院医学院微生物与免疫学研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31101878);河南理工大学杰出青年科学基金项目(J2014-02);河南理工大学青年骨干教师项目(649263);河南理工大学博士基金项目(B2010-7) |
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| 摘 要： | 硒蛋白是一类含有硒代半胱氨酸(Selenocysteine,Sec)的蛋白质,具有抗氧化和免疫调节等多种生物学功能。尽管目前已知硒对鱼类生长发育、抗氧化和免疫等方面有着重要的作用,但是有关鱼类硒蛋白的研究还不全面,特别是对鱼类硒蛋白W(Selenoprotein W,Sel W)的结构和功能还知之甚少。为了深入研究鱼类硒蛋白的结构特征和生理作用,本文利用RT-PCR和RACE技术从肝胰脏中克隆获得了鲤鱼Cyprinus carpio Sel W的c DNA全长序列(cc Sel W)。cc Sel W c DNA全长704 bp,含有261 bp的开放阅读框,编码86个氨基酸。预测的cc Sel W分子量为9.5 k D,在其N-端含有特征序列C-X-X-U基序,且第13位氨基酸为13Sec。在cc Sel W c DNA 3'-UTR区域含有一个89 bp的Sec插入序列(Sec-insertion sequence,SECIS),形成经典的AUGA-AA-GA型SECIS。由于在其SECIS二级结构的顶环上有一个额外的小茎-环结构,所以鲤鱼SECIS属于Ⅱ型SECIS结构。cc Sel W与斑马鱼Danio rerio和热带爪蟾Xenopus tropicalis的同源性最高,均为84.7%,与其他物种的同源性在54%~60%之间。系统发育树结果显示,cc Sel W和斑马鱼、两栖类位于同一分支上。RT-PCR结果显示,cc Sel W mRNA在所检测的11个组织中均有表达,其中以精巢中的表达量为最高,下丘脑和肠中表达量次之,其余组织中表达量大致相当,低于精巢、下丘脑和肠。这些结果丰富了鱼类Sel W的研究内容,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鲤鱼 硒蛋白W 克隆 组织表达 |
Molecular Cloning,Sequence Analysis and Tissue Expression of Selenoprotein W in Common Carp |
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