| TNF-α转化酶酵母双杂交系统"诱饵"质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘鑫,于洪伟,王凤丹,王建醒,王淑娟,于晓光.TNF-α转化酶酵母双杂交系统"诱饵"质粒的构建及鉴定[J].中国应用生理学杂志,2008,24(2):144-147. |
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| 作者姓名： | 刘鑫 于洪伟 王凤丹 王建醒 王淑娟 于晓光 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学基础医学学院,生物化学与分子生物学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081 |
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| 基金项目： | 黑龙江省卫生厅科研项目 |
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| 摘 要： | 目的：构建酵母双杂交系统“诱饵”质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法：从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果：本实验成功构建了“诱饵”质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论：构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。
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| 关 键 词： | TNF-α转化酶 酵母双杂交系统 自激活作用 转化酶 酵母双杂交系统 实验基础 蛋白 相互作用 文库 小鼠 筛选 应用 诱饵质粒 质粒载体 结果 自激活 System 序列分析 酶切鉴定 克隆 TACE 组织提取 鼠肝 |
| 文章编号： | 1000-6834(2008)02-144-03 |
| 修稿时间： | 2006年7月21日 |
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