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EGR1基因在牛骨骼肌卫星细胞分化不同时期的表达及定位
引用本文:张伟伟,邵淑丽,潘阳,李珊珊.EGR1基因在牛骨骼肌卫星细胞分化不同时期的表达及定位[J].中国应用生理学杂志,2019,35(1):5-8.
作者姓名:张伟伟  邵淑丽  潘阳  李珊珊
作者单位:1. 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 2. 抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室, 黑龙江 齐齐哈尔 161006
基金项目:黑龙江省自然科学基金(C2016057, C201241, C2017068); 黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(135209260, 135109104,135109309); 齐齐哈尔市科学技术计划项目(NYGG-201515, NYGG-201616)
摘    要:目的:研究EGR1基因在牛骨骼肌卫星细胞(MDSCs)分化过程的表达、定位及入核机制。方法:以牛的MDSCs为实验材料,在分化培养基中分别分化培养1 d、3 d和5 d,每组3个重复,检测不同分化时间的MDSCs中EGR1基因的表达和EGR1蛋白的定位情况;采用 CRISPRi方法干扰内源EGR1的表达,结合定点突变和激光共聚焦方法初步探索了EGR1蛋白入核的机制。结果:qRT-PCR和Western blot检测结果显示随着分化时间的进行,EGR1 基因在转录水平和蛋白水平的表达都显著高于未分化的细胞,并随时间的延长而表达逐渐升高,分化第3日时表达量最高,随后开始下降。免疫荧光检测到EGR1蛋白主要在分化的MDSCs中表达,并随肌管数量增多而表达量增加。共聚焦结果显示随着细胞分化的进行,部分EGR1蛋白转移进入细胞核。定点突变EGR1蛋白S533A后,分化的MDSCs细胞核内没有检测到EGR1蛋白。结论:在牛骨骼肌卫星细胞分化过程中,EGR1基因转录表达水平升高,部分EGR1蛋白转移入细胞核,且EGR1蛋白C端第533位丝氨酸磷酸化是入核所必需的。

关 键 词:牛骨骼肌卫星细胞  分化  EGR1基因  入核作用  
收稿时间:2018-05-30

Expression of EGR1 gene and location of EGR1 protein in differentiation of bovine skeletal muscle-derived satellite cells
ZHANG Wei-wei,SHAO Shu-li,PAN Yang,LI Shan-shan.Expression of EGR1 gene and location of EGR1 protein in differentiation of bovine skeletal muscle-derived satellite cells[J].Chinese Journal of Applied Physiology,2019,35(1):5-8.
Authors:ZHANG Wei-wei  SHAO Shu-li  PAN Yang  LI Shan-shan
Institution:1. College of Life Sciences, Agriculture and Forestry; 2. Heilongjiang Provincial Key Laboratory of Resistance Gene Engineering and Protection of Biodiversity in Cold Areas; Qiqihar University, Qiqihar 161006
Abstract:
Keywords:bovine skeletal muscle derived satellite cells  differentiation  EGR1 gene  enter the nucleus  
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