一种可用于500μm脑片的高分辨率细胞内标记技术

目的：建立简便高效的、与脑片盲法膜片钳记录相结合的生物胞素细胞内标记染色方法。方法：制备大鼠听皮层脑片（500 μm），采用盲法脑片膜片钳全细胞记录，泳入生物胞素（0.2％）对记录细胞进行标记，经组织化学显色和甘油封片后，沿显微镜Z轴，每隔30 μm拍摄一帧显微数码图像，利用Adobe Photoshop软件对神经元进行三维重建。结果：标记的神经元层次清楚，可在光镜下分辨出胞体、轴树突分支、棘突等细微结构，而且非特异性背景染色浅；不需要进行厚脑片的二次切片即可对神经元进行三维重建。结论：本方法简便易行，结果可靠，分辨率高，而且对设备要求不高。