| 小麦根腐病菌索氏平脐蠕孢SYBR Green I实时荧光定量PCR检测技术研究 |
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| 引用本文： | 陈清清,孙炳剑,袁虹霞,施艳,李洪连.小麦根腐病菌索氏平脐蠕孢SYBR Green I实时荧光定量PCR检测技术研究[J].菌物学报,2014,33(3):690-696. |
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| 作者姓名： | 陈清清 孙炳剑 袁虹霞 施艳 李洪连 |
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| 作者单位： | 河南农业大学小麦玉米作物学国家重点实验室 河南粮食作物协同创新中心 河南 郑州 450002;河南农业大学小麦玉米作物学国家重点实验室 河南粮食作物协同创新中心 河南 郑州 450002;河南农业大学小麦玉米作物学国家重点实验室 河南粮食作物协同创新中心 河南 郑州 450002;河南农业大学小麦玉米作物学国家重点实验室 河南粮食作物协同创新中心 河南 郑州 450002;河南农业大学小麦玉米作物学国家重点实验室 河南粮食作物协同创新中心 河南 郑州 450002 |
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| 基金项目： | 国家“十二五”粮食丰产科技工程项目（No. 2012BAD04B07）；中国科学院重点部署项目（No. CXJO120111）；河南省农业科技创新项目（No. 2012-06） |
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| 摘 要： | 由索氏平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana引起的小麦根腐病,常和其他土传真菌病害混合发生,传统的症状鉴别方法很难区分,导致病害防控难度增加。为建立病菌实时荧光定量检测体系,根据ITS序列设计引物,筛选出1对特异性引物BS‐F/R,扩增片段大小为280bp。以菌丝DNA为标准品构建实时荧光定量标准曲线,并对其灵敏度、特异性、可重复性进行评价。结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性好。构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,扩增效率良好。利用该定量检测体系,可以检测出田间小麦样品中52.8fg/μL的病菌DNA。
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| 关 键 词： | 土传病害 菌丝DNA ITS序列 实时荧光定量PCR 小麦根腐病菌 定量检测 |
Quantitative detection of Bipolaris sorokiniana in winter wheat based on SYBR Green I real-time PCR |
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| Authors: | CHEN Qing-Qing SUN Bing-Jian YUAN Hong-Xi SHI Yan and LI Hong-Lian |
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| Institution: | National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science, Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China;National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science, Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China;National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science, Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China;National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science, Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China;National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science, Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soil-borne disease mycelium DNA ITS sequence real-time PCR Bipolaris sorokiniana quantitative detection |
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