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应用PCR方法检测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性
引用本文:李红霞,周明国,陆悦健.应用PCR方法检测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性[J].菌物学报,2002,21(3):370-374.
作者姓名:李红霞  周明国  陆悦健
作者单位:南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室,南京,210095
基金项目:国家“863”计划(2001AA249041),国家自然科学基金(30070510)
摘    要:通过保守的寡核苷酸引物B1/B3扩增出油菜菌核病菌MBCHR和MBCS菌株的部分β-微管蛋白基因,结果发现编码的198位氨基酸由Glu(GAG)突变为Ala(GCG),表现高水平抗药性。根据MBCHR菌株的突变设计2个快速检测方法:第一种方法是根据MBCHR菌株197和198位密码子(GACGAG→GACGCG)形成ThaI酶切位点(3’CGCG 5’),将B1/B3的扩增产物874bp片段酶切成193bp和681bp片段,而MBCS菌株的PCR产物不被酶切;第二种方法用198位突变密码子作为3’末端碱基设计2个等位基因特异性寡核苷酸引物(ASO)用于“nested”PCR或直接从基因组DNA扩增。通过PCR扩增和ThaI酶切能直接检测油菜菌核病菌的MBCHR和MBCS菌株,所得结果与传统菌落直径法相吻合。

关 键 词:植物病原真菌  苯并咪唑类杀菌剂
文章编号:1007-3515(2002)03-0370-0374
修稿时间:2002年1月24日

USING POLYMERASE CHAIN REACTION FOR DETECTION OF CARBENDAZIM RESISTANCE IN SCLEROTINIA SCLEROTIORUM
Authors:LI Hong-Xia  ZHOU Ming-Guo  LU Yue-Jian
Abstract:
Keywords:Plant pathogenic fungi  benzimidazole fungicides
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