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嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶基因(Im)的克隆及其在毕赤酵母中的表达
引用本文:李萌,郭晓红,李多川.嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶基因(Im)的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].菌物学报,2015,34(3).
作者姓名:李萌  郭晓红  李多川
作者单位:山东农业大学环境生物系 山东泰安271018
摘    要:研究从嗜热毛壳菌Chaetomium thermophilum中克隆了一个新的脂肪酶基因(lm).其中DNA序列包含一个由870个碱基构成的开放阅读框,编码289个氨基酸,含有4个内含子,没有信号肽序列.序列提交GenBank,登录号为GU338248.将该基因在毕赤酵母中表达.在甲醇的诱导下,重组蛋白得到了高效表达,第6天的表达量最高,蛋白达到0.428mg/mL,酶活力为19.77U/mg.SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为35kDa.该脂肪酶的最适反应温度为60℃,具有热稳定性,在40-80℃热稳定,80℃处理60min仍有65%的相对酶活.该酶最适反应pH值为10.0,在pH 9.0--12.0酶活相对稳定.该酶具有较好的热稳定性和耐碱性,具有良好的工业应用价值.

关 键 词:嗜热真菌  分子量  酶活  最适温度  最适pH  热稳定性

Cloning of a novel thermostable lipase gene (Im) from Chaetomium thermophilum and its expression in Pichia pastoris
Authors:LI Meng  GUO Xiao-Hong  LI Duo-Chuan
Abstract:
Keywords:thermophilic fungus  molecular mass  enzyme activity  optimal temperature  optimal pH  thermostability
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