| PEG介导的柱状田头菇遗传转化体系建立 |
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| 引用本文： | 陶南,崔祥华,柴红梅,马渊浩,赵永昌,陈卫民.PEG介导的柱状田头菇遗传转化体系建立[J].菌物学报,2020,39(6):1100-1108. |
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| 作者姓名： | 陶南 崔祥华 柴红梅 马渊浩 赵永昌 陈卫民 |
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| 作者单位： | 1. 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 云南 昆明 6502232. 云南省农业生物技术重点实验室 云南 昆明 6502233. 农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室 云南 昆明 6502234. 西南林业大学生命科学学院 云南 昆明 650224 |
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| 基金项目： | 现代农业(食用菌)产业技术体系(CARS20);国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 柱状田头菇（茶树菇）Agrocybe aegerita是一种美味的食用菌,具有极高的经济价值。随着其全基因组测序的完成,功能基因组学研究也逐渐展开,其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。本研究以柱状田头菇原生质体为受体、潮霉素抗性基因（hph）作为筛选标记,以增强型绿色荧光蛋白基因（egfp）为报告基因,应用PEG介导法进行柱状田头菇遗传转化体系研究。结果表明,150μg/mL潮霉素可以完全抑制柱状田头菇的生长。30℃下用2%裂解酶液酶解菌丝3h,能够获得最大得率的原生质体。通过PEG介导将构建好的DNA片段转化入柱状田头菇原生质体,通过潮霉素抗性筛选获得转化子,转化得率达到7个/μg DNA。PCR验证和荧光显微镜观察,外源片段成功转入柱状田头菇中并稳定表达。本研究建立的PEG介导转化体系,为柱状田头菇基因功能研究提供了技术基础。
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| 关 键 词： | 柱状田头菇 PEG介导转化 潮霉素 绿色荧光蛋白 |
| 收稿时间： | 2020-03-10 |
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