简易的无氧柱层析方法

柱层析(离子交换,吸附和凝胶过滤)是分离纯化蛋白质,酶和其他一些生物活性物质的重要手段。国外已有各种型号的成套装置作为商品出售,但是遇到对氧敏感的样品,必须设法在整个操作过程中,保持无氧状态。几年来我们在固氮酶的研究中,逐步掌握了一些简单而行之有效,且在一般实验室条件下都能办到的无氧柱层析方法。现在扼要介绍如下,以供有关工作参考。一、应用器皿中气体的抽换首先要把实验中所用的贮液瓶及收集瓶中的空气都换成惰性气体(如氮、氩等)。根据需要可选用不同容积的抽滤瓶盛装洗脱液。抽滤瓶口的橡皮塞中插入一玻璃管,管口配以尺寸合适的盐水瓶塞,如图1所示。