| 瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ及其CBD的噬菌体表面展示系统的构建 |
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| 引用本文： | 黄琰,张曦,马安周,庄国强,曲音波.瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ及其CBD的噬菌体表面展示系统的构建[J].生物加工过程,2006,4(1):21-26. |
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| 作者姓名： | 黄琰 张曦 马安周 庄国强 曲音波 |
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| 作者单位： | 山东大学,微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家973资助项目(No.2003CB716000)，国家自然科学基金项目(No.30370036)，山东大学微生物技术国家重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 为研究纤维素酶的酶活性和吸附特性之间的关系,将瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ(endoglucanaseⅠ,EGⅠ)和其吸附结构域(cellulose-binding domains,CBD)的基因经PCR扩增后,连接到载体pCANTAB5E上,构建成噬菌粒展示载体pCANTAB5E-egⅠ和pCANTAB5E-egⅠ-cbd。将这些噬菌体展示载体转化到大肠杆菌TGⅠ中,在辅助噬菌体M13KO7的帮助下得到重组噬菌体。用ELISA和Somogyi方法分别测定了EGⅠ及其CBD的表面展示噬菌体对纤维素的亲和性和EGⅠ的CMC活性,结果显示EGⅠ及其CBD已功能展示于噬菌体表面。该系统的成功构建为今后利用噬菌体展示的方法进行纤维素酶的酶分子改造提供了基础。
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| 关 键 词： | 噬菌体表面展示 瑞氏木霉内切葡聚糖酶 纤维素吸附结构域 |
| 文章编号： | 1672-3678（2006）01-0021-06 |
| 收稿时间： | 2006-01-10 |
| 修稿时间： | 2006年1月10日 |
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