载体两性电解质修饰对固定化γ-谷氨酰转肽酶pH耐受性和催化活性的影响

针对γ-谷氨酰转肽酶(GGT)p H耐受性差的缺陷,首先以硅烷化改性的介孔氧化钛晶须(s MTw)为载体对重组枯草芽胞杆菌GGT进行固定化,再以p H 8.0~10.5的载体两性电解质Pharmalyte(CA,p H 8.0~10.5)对其进行后修饰,得到固定化酶s MTw-GGT-CA。结果发现:s MTw-GGT-CA的p H耐受性较游离酶明显提高,可在p H 6.0~11.0范围内保持稳定的催化活性。同时,s MTw-GGT-CA的热稳定性也较游离酶有所提高,其最适作用温度为50℃左右,热失活反应活化能Ed为49.88 k J/mol。s MTw-GGT-CA对γ-谷氨酰对硝基苯胺(Gp NA)的亲和力常数Km为0.579 mmol/L,与游离酶相近。