应用PCR方法检测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性 |
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引用本文: | 李红霞,周明国,等.应用PCR方法检测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性[J].菌物系统,2002,21(3):370-374. |
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作者姓名: | 李红霞 周明国 |
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摘 要: | 通过保守的寡核苷酸引物B1/B3扩增出油菜菌核病菌MBC^HR和MBC^S菌株的部分β-微管蛋白基因,结果发现编码的198位氨基酸由Clu(GAG)突变为Ala(GCG),表现高水平抗药性。根据MBC^HR菌株的突变设计2个快速检测方法:第一种方法是根据MBC^HR菌株197和198位密码子(GACGAG→GACGCG)形成HhaI酶切点(3'CGCG 5'),将B1/B3的扩增产物874bp片段酶切成193bp和681bp片段,而MBC^S菌株的PCR产物不被酶切;第二种方法用198位突变密码子作为3'末端碱基设计2个等位基因特异性寡核苷酸引物(ASO)用一地“nested”PCR或直接从基因组DNA扩增。通过PCR扩增和ThaI酶切能直接检测油菜菌核病菌的MBC^HR和MBC^S菌株,所得结果与传统菌落直径法相吻合。
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关 键 词: | 植物病原真菌 苯并咪唑类杀菌剂 PCR方法 检测 油菜菌核病菌 多菌灵 抗药性 |
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