米曲霉LY-128广谱有机磷农药水解酶的纯化和鉴定 |
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引用本文: | 刘阳,刘玉焕,陈志仕,廉婕,罗维佳,黄晓,钟英长.米曲霉LY-128广谱有机磷农药水解酶的纯化和鉴定[J].菌物系统,2003,22(4):557-564. |
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作者姓名: | 刘阳 刘玉焕 陈志仕 廉婕 罗维佳 黄晓 钟英长 |
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摘 要: | 米曲霉LY-128的培养物经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤,DEAE-Sephrose CL-6B和Sephadex G-100层析手段,获得了电泳纯的广谱有机磷农药水解酶。通过SDS-PAGE和IEF电泳测得其分子量为62kDa,等电点为pH5.2。该酶的最适反应温度为45℃,最适pH6.8,在50℃以下及pH6.0~9.5范围内活性稳定。Hg^2 、Fe^3 、对氯高汞苯甲酸、碘乙酸和N-乙基马来酰亚胺对该酶有强烈的抑制作用,而Cu^2 、巯基乙醇、二硫苏糖醇、二硫赤藓糖醇、谷光甘肽和去污剂对酶有不同程度的激活作用。底物的专一性实验表明,该酶不仅可以作用于含P-O键的有机磷农药;而且也能水解含P-S键的有机磷农药。以甲基对硫磷和内吸磷为底物的Km值分别为52μmol、236μmol;Vmax分别为317μmol min^-1mg^-1、179μmol min^-1mg^-1;Kcat分别为1152s^-1、650s^-1。
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关 键 词: | 生物降解 基本性质 最适反应条件 |
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