DNA浓度与其Raman光谱强度间的线性相关的分析

Ｒａｍａｎ光谱法业已广泛应用于生物医学，生物化学和分子生物学等很多领域，尤其是近年来傅立叶转换Ｒａｍａｎ光谱技术（ＦＴ—Ｒａｍａｎｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）的兴起，引起人们极大兴趣。本文介绍Ｒａｍａｎ光谱技术应用的一个新领域一对溶液中ＤＮＡ浓度的测定。溶液中ＤＮＡ浓度的测定，是生物化学和生物医学上经常遇到的问题，通常采用紫外分光光度法。当要分析ＤＮＡ构型变化时，最常用的方法是Ｘ线晶体衍射，核磁共振和Ｒａｍａｎ光谱法。为了进一步研究ＤＮＡ构型变化与浓度变化之间的关系，进行了ＤＮＡ的Ｒａｍａｎ光谱强度与浓度间的线性相关研究。以ＨＰＫ１Ａ细胞ＤＮＡ的８１０ｃｍ－１Ｒａｍａｎ光谱峰作为线性相关分析的内标，实验结果表明该ＤＮＡ的Ｒａ－ｍａｎ光谱强度与浓度间存在着良好的线性相关（Ｒ＝０．９９３）。其检出限为０．１０μｇ／μｌ，标准差（ＳＤ）为０．００３（ｎ＝１１），相对标准差（ＲＳＤ）为２．７３％。应用ＦＴ—Ｒａｍａｎ光谱术测定溶液中ＤＮＡ浓度，方法简单，样品不需特殊处理，灵敏和准确。本文详细讨论了该法的操作步骤和注意事项。