| 拟康氏木霉eg1基因的克隆及在酿酒酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 陶芳,王旭,江海洋,范军,朱苏文,程备久.拟康氏木霉eg1基因的克隆及在酿酒酵母中的分泌表达[J].激光生物学报,2011,20(6). |
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| 作者姓名： | 陶芳 王旭 江海洋 范军 朱苏文 程备久 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036 |
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| 基金项目： | 安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目 |
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| 摘 要： | 从拟康氏木霉3.3002基因组中克隆了内切葡聚糖酶EGI基因,该基因全长1566 bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸.编码蛋白EGI的N端为22aa组成的信号肽,其后依次为催化结构域、连接肽和结合结构域.采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因eg1,并将其成熟肽编码序列插入酿酒酵母分泌型表达载体pYEα中,构建成pYEα-Peg1重组质粒,转化酿酒酵母.重组转化子经β-半乳糖诱导,检测表达产物的分子大小以及酶活,结果表明,转化子在刚果红平板上可产生明显的水解圈；酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EG I并分泌到胞外；SDS-PAGE电泳显示EGI蛋白分子量比预期目的蛋白稍偏大.
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| 关 键 词： | 拟康氏木霉 eg1 酿酒酵母 分泌表达 |
Cloning Of eg1 Gene from Trichoderma pseudokoningii and Its Secretory Expressioh in Saccharomyces cerevisiae |
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| TAO Fang,WANG Xu,JIANG Haiyang,FAN Jun,ZHU Suwen,CHENG Beijiu.Cloning Of eg1 Gene from Trichoderma pseudokoningii and Its Secretory Expressioh in Saccharomyces cerevisiae[J].ACTA Laser Biology Sinica,2011,20(6). |
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| Authors: | TAO Fang WANG Xu JIANG Haiyang FAN Jun ZHU Suwen CHENG Beijiu |
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