| Nodal蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 宋怀婷,梁洁,莫小阳,邓云,万永奇,李永青,袁婺洲,江志钢,吴秀山,王跃群.Nodal蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备[J].激光生物学报,2010,19(6):813-816. |
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| 作者姓名： | 宋怀婷 梁洁 莫小阳 邓云 万永奇 李永青 袁婺洲 江志钢 吴秀山 王跃群 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南长沙410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，国家重点基础研究发展计划资助项目 |
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| 摘 要： | 斑马鱼心脏发育模型中Nodal编码转录因子调节心脏的左右不对称发育,为了进一步研究Nodal信号途径在心脏发育中的调控作用和心脏疾病发生的分子机制,需要获得斑马鱼Nodal蛋白并制备其抗体.采用从斑马鱼心脏组织中提取RNA,通过反转录得到心脏组织各种表达基因的cDNA为模板,PCR扩增得到Nodal部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达.经酶切及测序鉴定后,转化Rosseta细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体.获得了Nodal原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Nodal多克隆抗体,为Nodal功能的进一步研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | Nodal 融合蛋白 多克隆抗体 |
Expression, Purification of Nodal Fusion Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| SONG Huai-ting,LIANG Jie,MO Xiao-yang,DENG Yun,WAN Yong-qi,LI Yong-qing,YUAN Wu-zhou,JIANG Zhi-gang,WU Xiu-shan,WANG Yue-qun.Expression, Purification of Nodal Fusion Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].ACTA Laser Biology Sinica,2010,19(6):813-816. |
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| Authors: | SONG Huai-ting LIANG Jie MO Xiao-yang DENG Yun WAN Yong-qi LI Yong-qing YUAN Wu-zhou JIANG Zhi-gang WU Xiu-shan WANG Yue-qun |
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| Institution: | (The Center for Heart Development, Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry, Hunan Normal University, Changsha 410081, Hunan, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nodal fusion protein polycloual antibody |
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