| 永瓣藤ISSR—PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 郝朝运,张小平,范睿.永瓣藤ISSR—PCR反应体系的建立与优化[J].激光生物学报,2008,17(5). |
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| 作者姓名： | 郝朝运 张小平 范睿 |
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| 作者单位： | 安徽师范大学安徽省重要生物资源保护与利用研究重点实验室,安徽,芜湖,241000;安徽师范大学生物环境与生态安全安徽省高校重点实验室,安徽,芜湖,241000 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金，教育部高等学校博士学科点专项科研基金，安徽省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以永瓣藤基因组DNA为模板,通过单因子、双因子实验研究了ISSR反应体系中主要成分(Mg2 、dNTP、引物、模板DNA、TaqDNA聚合酶)以及热循环参数(退火温度、循环数、变性时间、退火时间、延伸时间)对扩增结果的影响,并找出各自的最适条件,建立了适合永瓣藤ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25 μL反应体系中,内含1×PCR buffer、1.5 mmol/L Mg2 、200 μmol/L dNTP、0.5 μmol/L引物、50 ng 模板、2 U TaqDNA聚合酶.扩增程序为94 ℃预变性5 min,然后进行35个循环:94 ℃变性30 s,复性1 min,72 ℃延伸1 min,循环结束后72 ℃延伸7 min.这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术进行永瓣藤鉴定及种质遗传多样性分析提供了一个标准化程序.
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| 关 键 词： | 永瓣藤 反应体系 热循环参数 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Monimopetalum chinense |
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| HAO Chao-yun,ZHANG Xiao-ping,FAN Rui.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Monimopetalum chinense[J].ACTA Laser Biology Sinica,2008,17(5). |
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| Authors: | HAO Chao-yun ZHANG Xiao-ping FAN Rui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR |
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