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高内涵法探讨土槿皮乙酸对MCF-7细胞抑制作用的机制
引用本文:段绍维,徐波,陈云利,李敏,傅宏征,崔景荣.高内涵法探讨土槿皮乙酸对MCF-7细胞抑制作用的机制[J].生物化学与生物物理进展,2010,37(12):1313-1322.
作者姓名:段绍维  徐波  陈云利  李敏  傅宏征  崔景荣
作者单位:北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191
基金项目:国家“十一五”攻关项目, 重大新药创制资助项目(2009ZX09301- 010)
摘    要:土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)是土槿皮(金钱松根皮)的主要生物活性成分,对多种人肿瘤细胞有细胞毒性作用.高内涵分析(high content analysis,HCA)是一种基于荧光显微技术的新技术,它以细胞为研究对象,可以同时对多个 荧光靶点的荧光强度、分布,以及细胞形态进行自动化定量分析.利用高内涵分析、流式细胞术研究PAB 对人乳腺癌MCF-7 细胞抑制作用的机制.磺酰罗丹明实验显示,PAB 抑制MCF-7 细胞增殖,且呈现出剂量和时间依赖性,72 h IC50为(1.80±0.33) μmol/L.流式细胞术碘化丙锭(PI)单染显示PAB 作用24 h,可致MCF-7 细胞 G2/M 期比例增至93% 以上,annexin V-FITC 和PI 双染显示PAB 促进MCF-7 细胞凋亡.高内涵分析显示:PAB 作用16 h,MCF-7 细胞有丝分裂指数可达40% 左右,伴有cyclin B1 含量增加;PAB 促进微管解聚,干扰有丝分裂二极纺锤体形成;PAB 引起线粒体增生;PAB 导致“葡萄串样”细胞核形成,提示有丝分裂滑脱.结果表明,PAB 抑制MCF-7 细胞增殖、促进MCF-7 细胞凋亡,这些作用可能与其促进微管蛋白解聚、干扰二极纺锤体形成、阻滞有丝分裂、促进线粒体增生有关.

关 键 词:高内涵分析,土槿皮乙酸,MCF-7  细胞,微管,有丝分裂阻滞,凋亡
收稿时间:2010/6/25 0:00:00
修稿时间:2010/9/27 0:00:00

Explore The Mechanism of Inhibitory Effects of Pseudolaric Acid B on MCF-7 Cells by High Content Analysis
DUAN Shao-Wei,XU Bo,CHEN Yun-Li,LI Min,FU Hong-Zheng and CUI Jing-Rong.Explore The Mechanism of Inhibitory Effects of Pseudolaric Acid B on MCF-7 Cells by High Content Analysis[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2010,37(12):1313-1322.
Authors:DUAN Shao-Wei  XU Bo  CHEN Yun-Li  LI Min  FU Hong-Zheng and CUI Jing-Rong
Institution:State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China;State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China;State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China;State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China;State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China;State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University, Beijing 100191, China
Abstract:
Keywords:high content analysis  pseudolaric acid B  MCF-7 cells  microtubule  mitotic arrest  apoptosis
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