| 人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl-转运过程中作用的研究 |
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| 引用本文： | 刘利梅,傅国辉,王天英,姜晓姝,郭卓维,史从宁.人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl-转运过程中作用的研究[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(2):245-250. |
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| 作者姓名： | 刘利梅 傅国辉 王天英 姜晓姝 郭卓维 史从宁 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086;哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086;哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086;哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086;哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086;哈尔滨医科大学病理生理教研室，哈尔滨 150086 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目（30230160）,面上项目（39970291, 30170348）资助. |
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| 摘 要： | 采用酵母表面展示系统，表达带3蛋白膜段结构域(Gln404～Val911)至酵母细胞膜，功能研究表明，表达后的膜段结构域具有离子转运的活性，同时，带3蛋白抑制剂4,4′-二异硫氰-2,2′-二黄酸芪(DIDS)能够抑制其离子转运的功能.利用PCR方法，以pFAST-Bac-mdb3为模板扩增出带3蛋白膜段结构域的4种截断突变体，分别去除带3蛋白C端域后4个(Ala908～Val911)、16个(Asp896～Val911)、20个(Lys892～Val911)、32个(Asn880～Val911)氨基酸序列，测序后将其克隆至表达载体pYD1上，构建酵母表达质粒pYD1-Trunc4、pYD1-Trunc16、pYD1-Trunc20和pYD1-Trunc32，诱导4组突变体的蛋白质表达.然后测定Cl-的转运活性，结果发现去除后20个(Lys892～Val911)氨基酸残基后，离子转运活性明显下降，而去除后32个(Asn880～Val911)后，离子转运没有进一步下降，说明Lys892～Phe895 4个氨基酸残基在带3蛋白的离子转运过程中发挥重要作用.
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| 关 键 词： | 带3蛋白，截断突变体，酵母表面展示系统 |
| 收稿时间： | 2002/10/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2002年10月8日 |
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