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Connexin31 相互作用蛋白筛选、证实与功能研究
引用本文:刘 宇,谭志平,潘 乾,贺立强,蔡 芳,邬玲仟,梁德生,夏 昆,夏家辉,张灼华.Connexin31 相互作用蛋白筛选、证实与功能研究[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(1):18-24.
作者姓名:刘 宇  谭志平  潘 乾  贺立强  蔡 芳  邬玲仟  梁德生  夏 昆  夏家辉  张灼华
作者单位:中南大学医学遗传学国家重点实验室,长沙,410078
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973)(2001CB510302),国家高技术863计划资助项目(2002BA711A07)和国家自然科学基金资助项目(30370737,30123006).
摘    要:筛选间隙连接蛋白 31 (connexin31 , Cx31) 相互作用蛋白并研究其在 Cx31 运输中的功能 . 运用制备的抗 Cx31 多克隆抗体免疫沉淀, SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,电喷雾 - 四极杆 - 飞行时间质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实,确定 actin 为 Cx31 相互作用蛋白 . 用药物处理细胞,抑制 actin 的功能,观察 Cx31 定位与间隙连接通道的通透性,确定 actin 在 Cx31 运输中的功能 . 当药物抑制 actin 的功能时, Cx31 很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道, Cx31 主要分布在胞质中;当药物抑制 tublin 的功能时, Cx31 能到达细胞膜上形成间隙连接通道,细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象,但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加 . Actin 在 Cx31 运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用 .

关 键 词:Cx31  ,间隙连接蛋白相互作用蛋白,细胞免疫共定位,免疫共沉淀

Screening, Identification and Functional Research of The Human gap Junction Connexin 31 Interaction Proteins
LIU Yu,TAN Zhi-Ping,PAN Qian,HE Li-Qiang,CAI Fang,WU Ling-Qian,LIANG De-Sheng,XIA Kun,XIA Jia-Hui and ZHANG Zhuo-Hua.Screening, Identification and Functional Research of The Human gap Junction Connexin 31 Interaction Proteins[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2005,32(1):18-24.
Authors:LIU Yu  TAN Zhi-Ping  PAN Qian  HE Li-Qiang  CAI Fang  WU Ling-Qian  LIANG De-Sheng  XIA Kun  XIA Jia-Hui and ZHANG Zhuo-Hua
Institution:National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China;National Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha 410078, China
Abstract:
Keywords:connexin31  protein-protein interaction  colocalization  coimmunoprecipitation
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