| DNA足纹步移作图法 |
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| 引用本文： | 谭文斌,朱敏,聂怡玲,罗赛群,成光杰,胡维新,彭兴华.DNA足纹步移作图法[J].生物化学与生物物理进展,2001,28(4):551-555. |
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| 作者姓名： | 谭文斌 朱敏 聂怡玲 罗赛群 成光杰 胡维新 彭兴华 |
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| 作者单位： | 湖南医科大学分子生物学研究中心, |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（39700050及39900159）项目.本项技术已申请国家专利，注册登记号为：00113519.8.. |
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| 摘 要： | 一种以PCR介导的、可对任意长度靶DNA片段上的核蛋白结合位点进行DNA足纹作图分析的新方法.原理是：采用被随机降解靶DNA分子作为模板，用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增.首先，利用某种化学试剂或酶如DNaseⅠ对已与蛋白质结合或未结合的双链靶DNA进行随机降解，在一定条件下使每一个DNA分子恰好只有一个位点被切割.然后，这些被随机降解DNA分子即可作为模板，用同位素标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物（正向或反向）进行单链扩增.最后，扩增的单链产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影形成DNA片段梯队，而被蛋白质保护的位点则在DNA片段梯队中形成位置缺口，从而确定DNA与蛋白质相结合的精确位点.该方法被应用对人干细胞因子基因5′旁侧－1190～－273区域的DNA足纹部分作图.
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| 关 键 词： | DNA足纹分析，聚合酶链式反应，人干细胞因子基因 |
| 收稿时间： | 2000/8/24 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2000年8月24日 |
A Method of DNA Footprinting Walking Map |
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| TAN Wen-Bin,ZHU Min,NIE Yi-Ling,LUO Sai-Qun,CHENG Guang-Jie,HU Wei-Xin and PENG Xing-Hua.A Method of DNA Footprinting Walking Map[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2001,28(4):551-555. |
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| Authors: | TAN Wen-Bin ZHU Min NIE Yi-Ling LUO Sai-Qun CHENG Guang-Jie HU Wei-Xin and PENG Xing-Hua |
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| Institution: | Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China;Molecular Biology Research Center, Hunan Medical University, Changsha 410078, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNA footprinting PCR human stem cell factor gene |
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