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水稻线粒体tRNATrp突变体的克隆和氨酰化活力鉴定
引用本文:金晓玲,巩菊芳,刘雪梅,王晓红,张日清.水稻线粒体tRNATrp突变体的克隆和氨酰化活力鉴定[J].生物化学与生物物理进展,2008,35(11):1320-1325.
作者姓名:金晓玲  巩菊芳  刘雪梅  王晓红  张日清
作者单位:中南林业科技大学环境艺术设计学院,长沙 410004;浙江师范大学化学与生命科学学院,金华 321004;中南林业科技大学环境艺术设计学院,长沙 410004;中南林业科技大学环境艺术设计学院,长沙 410004;中南林业科技大学资源与环境学院,长沙 410004
基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(Y204417).
摘    要:为了研究tRNATrp的氨基酸接受茎中除两对半碱基以外的特异性元件,设计并完成了4种水稻线粒体tRNATrp向枯草杆菌tRNATrp的突变体 (MPB0, G1A和U5G/A68C;MPB1,C2G/G71C;MPB2,C4G/G69C;MPB3,C2G/G71C和C4G/G69C),体外转录并用枯草杆菌和人这两种不同种属来源的色氨酰 tRNA 合成酶(TrpRS)测定了这些 tRNATrp 分子的氨酰化活力(Kcat/KM).结果表明,这些突变体具有被枯草杆菌TrpRS氨酰化的能力,与野生型水稻线粒体tRNATrp相比,MPB0被枯草杆菌TrpRS氨酰化的活力提高了5倍,MPB1和MPB2被枯草杆菌TrpRS氨酰化的活力分别提高了40和53倍,MPB3则提高了140倍,为野生型枯草杆菌tRNATrp的34%,而人色氨酰 tRNA合成酶氨酰化这4个突变体的活力都很微弱.揭示了水稻线粒体tRNATrp氨基酸接受茎上的2个碱基对C2/G71和C4/G69的突变,对枯草杆菌TrpRS的识别起重要作用,由此推测,接受茎上的2个碱基对C2/G71和C4/G69也是线粒体tRNATrp重要的特异性元件.

关 键 词:水稻线粒体tRNATrp,色氨酰tRNA合成酶,氨酰化活力,突变体
收稿时间:2008/3/30 0:00:00
修稿时间:6/5/2008 12:00:00 AM

Cloning and Aminoacryl Activity of Mutants From Oryza sativa Mitochondria tRNATrp
JIN Xiao-Ling,GONG Ju-Fang,LIU Xue-Mei,WANG Xiao-Hong and ZHANG Ri-Qing.Cloning and Aminoacryl Activity of Mutants From Oryza sativa Mitochondria tRNATrp[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2008,35(11):1320-1325.
Authors:JIN Xiao-Ling  GONG Ju-Fang  LIU Xue-Mei  WANG Xiao-Hong and ZHANG Ri-Qing
Institution:School of Environment and Art Design, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, China;College of Chemistry and Biology, Zhejiang Normal University, Jinhua 321004, China;School of Environment and Art Design, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, China;School of Environment and Art Design, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, China;School of Resources and Environment, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, China
Abstract:
Keywords:Oryza sativa mitochondria tRNATrp  tryptophanyl-tRNA synthetase (TrpRS)  aminoacryl activity  mutant
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