胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察 |
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引用本文: | 韩雅玲,徐 凯,康 建,闫承慧,田孝祥,李少华.胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(4):343-349. |
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作者姓名: | 韩雅玲 徐 凯 康 建 闫承慧 田孝祥 李少华 |
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作者单位: | 1. 沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,沈阳,110016 2. Department of Pathology and Laboratory Medicine, Rebert Wood Johnson Medical School, Piscataway, NJ08854, USA |
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摘 要: | 为探讨血管发育早期血管平滑肌细胞(VSMCs)募集和增殖特点,构建了含有SM22α启动子序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码序列的质粒,建立了平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下稳定表达EGFP的胚胎干细胞株(ESCs),以研究VSMCs的发育特点.实验发现,起源于SM22α-EGFPESCs形成的胚胎小体(EBs)在第11天开启SM22α启动子并表达EGFP.此后EGFP阳性细胞持续增加,在第30天达到高峰.VSMCs多起源于EBs中细胞密集处,应用免疫荧光染色及RT-PCR观察到EGFP阳性细胞表达多种平滑肌特异性标志物.在贴壁培养的胚胎小体中VSMCs形态可分为纺锤形及上皮样的多角形,慢速视频显微摄像测得纺锤形细胞迁移速度较上皮形细胞快.以上结果表明,SM22α-EGFPESCs分化形成的EBs可以模拟体内早期胚胎血管形成过程,从形态学上获得VSMCs募集分化的证据.
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关 键 词: | 平滑肌细胞 胚胎干细胞 分化 迁移 |
收稿时间: | 2005-11-01 |
修稿时间: | 2005-11-012005-12-28 |
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