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胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察
引用本文:韩雅玲,徐 凯,康 建,闫承慧,田孝祥,李少华.胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(4):343-349.
作者姓名:韩雅玲  徐 凯  康 建  闫承慧  田孝祥  李少华
作者单位:1. 沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,沈阳,110016
2. Department of Pathology and Laboratory Medicine, Rebert Wood Johnson Medical School, Piscataway, NJ08854, USA
摘    要:为探讨血管发育早期血管平滑肌细胞(VSMCs)募集和增殖特点,构建了含有SM22α启动子序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码序列的质粒,建立了平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下稳定表达EGFP的胚胎干细胞株(ESCs),以研究VSMCs的发育特点.实验发现,起源于SM22α-EGFPESCs形成的胚胎小体(EBs)在第11天开启SM22α启动子并表达EGFP.此后EGFP阳性细胞持续增加,在第30天达到高峰.VSMCs多起源于EBs中细胞密集处,应用免疫荧光染色及RT-PCR观察到EGFP阳性细胞表达多种平滑肌特异性标志物.在贴壁培养的胚胎小体中VSMCs形态可分为纺锤形及上皮样的多角形,慢速视频显微摄像测得纺锤形细胞迁移速度较上皮形细胞快.以上结果表明,SM22α-EGFPESCs分化形成的EBs可以模拟体内早期胚胎血管形成过程,从形态学上获得VSMCs募集分化的证据.

关 键 词:平滑肌细胞  胚胎干细胞  分化  迁移
收稿时间:2005-11-01
修稿时间:2005-11-012005-12-28
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