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干扰素诱导蛋白Nmi与IFP35的结合区域及Nmi亚细胞定位
引用本文:沈涓,刘迎芳.干扰素诱导蛋白Nmi与IFP35的结合区域及Nmi亚细胞定位[J].生物化学与生物物理进展,2014,41(7):659-665.
作者姓名:沈涓  刘迎芳
作者单位:中国科学院生物物理研究所,北京 100101;中国科学院大学,北京 100049,中国科学院生物物理研究所,北京 100101
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2012CB910204)
摘    要:人源N-Myc结合蛋白(N-Myc interactor,Nmi)能在干扰素(interferon,IFN)诱导后高表达,并参与下游的JAK-STAT通路,且有抑制癌细胞增殖的功能.Nmi能够结合人干扰素结合蛋白35(interferon-induced protein 35,IFP35)并保护IFP35不被降解.本研究构建了Nmi和IFP35的全长及N端截短体克隆,通过两种蛋白的共表达和GST pull down实验确定二者能够相互作用的区域,并进一步大量共表达和纯化了重组蛋白复合物.结合实验表明,与先前报道的两者通过C端串联的NID结构域相结合不同,两者的N端结构域都足以介导复合物形成.免疫荧光观察未经干扰素刺激的RAW264.7细胞,发现Nmi与IFP35共定位于细胞核内.免疫荧光观察Nmi在293A细胞中的分布特点,发现正常细胞中Nmi分布于细胞核内.如先前研究报道,干扰素诱导24h后,Nmi在胞质内形成颗粒状聚集,此时加入低浓度过氧化氢(H2O2)会使Nmi的亚细胞定位回到细胞核内,表明Nmi的亚细胞定位受到细胞氧化环境的影响.

关 键 词:Nmi  IFP  干扰素诱导蛋白  蛋白质相互作用  亚细胞定位
收稿时间:2013/4/24 0:00:00
修稿时间:6/3/2013 12:00:00 AM

Interaction Regions of N-Myc Interactor (Nmi) and Interferon-induced Protein 35 (IFP35) and Subcellular Localization of Nmi
SHEN Juan and LIU Ying-Fang.Interaction Regions of N-Myc Interactor (Nmi) and Interferon-induced Protein 35 (IFP35) and Subcellular Localization of Nmi[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2014,41(7):659-665.
Authors:SHEN Juan and LIU Ying-Fang
Institution:Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China and Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
Abstract:
Keywords:Nmi  IFP35  interferon-induced protein  protein interaction  subcellar localization
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