| 三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究 |
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| 引用本文： | 李红艳,周志明,潘强,杨冬梅,顾锦法,沈佳妮,王世兵,章康健.三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究[J].生物化学与生物物理进展,2014,41(6):558-566. |
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| 作者姓名： | 李红艳 周志明 潘强 杨冬梅 顾锦法 沈佳妮 王世兵 章康健 |
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| 作者单位： | 浙江理工大学生命科学学院，新元医学与生物技术研究所，杭州 310018；中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031,浙江理工大学生命科学学院，新元医学与生物技术研究所，杭州 310018,浙江理工大学生命科学学院，新元医学与生物技术研究所，杭州 310018,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031,浙江理工大学生命科学学院，新元医学与生物技术研究所，杭州 310018,浙江理工大学生命科学学院，新元医学与生物技术研究所，杭州 310018,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031 |
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| 基金项目： | 浙江理工大学项目(1204807-Y)，浙江理工大学科研启动基金(11610032611303)，国家重点基础研究发展计划(973)(2010CB529901, 2011CB510100)，浙江省自然科学基金(LY13H080005)和上海自然科学基金(13ZR1446300)资助项目 |
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| 摘 要： | IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-linker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考.
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| 关 键 词： | 连接子多肽 IETD EEED FA caspase活性 |
| 收稿时间： | 2013/12/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/3/11 0:00:00 |
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