| 幽门螺旋杆菌肿瘤坏死因子α诱导蛋白活性分子的构建、结晶及初步晶体学研究 |
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| 引用本文： | 高明明,张英,王大成.幽门螺旋杆菌肿瘤坏死因子α诱导蛋白活性分子的构建、结晶及初步晶体学研究[J].生物化学与生物物理进展,2012,39(12):1215-1219. |
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| 作者姓名： | 高明明 张英 王大成 |
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| 作者单位： | 中国科学院生物物理研究所,生物大分子国家重点实验室;中国科学院大学 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973)(2011CB910304,2011CB911103);中国科学院知识创新工程(KSCXZ-EW-J-3);卫生部重大新药创制专项(2009ZX09103-676)资助项目~~ |
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| 摘 要： | 幽门螺旋杆菌中的肿瘤坏死因子α诱导蛋白(Tipα)被鉴定为幽门螺旋杆菌致病感染中的新型致癌因子.Tipα通过NF-κB的激活诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)的大量表达,从而促使宿主的炎症反应以及肿瘤发生、发展的进程.Tipα的同源二聚体为其发挥生物学功能的活性形式,此二聚体以两个单体间N端半胱氨酸形成的二硫键(Cys25-Cys25与Cys27-Cys27)共价连接.Tipα(25-192)的基因克隆至载体pET22b中,并且在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中以可溶形式高水平表达.重组蛋白经过Ni2+金属亲和层析、阳离子交换层析和凝胶阻滞层析进行分离纯化.Tipα蛋白样品分别通过悬滴和microbatch的方法进行结晶搜索和优化.母体和硒代晶体分别衍射到2.2和2.6,均属于C2空间群,并且具有相似的晶胞参数.母体晶体的晶胞参数为a=127.01,b=47.57,c=96.5,α=γ=90°,β=127.5°.
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| 关 键 词： | 结晶 纯化 肿瘤坏死因子α诱导蛋白 致癌因子 幽门螺旋杆菌 |
| 收稿时间： | 2012/3/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/5/13 0:00:00 |
Crystallization and Preliminary Crystallographic Studies of Active TNF-α-Inducing Protein From Helicobacter Pylori |
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| GAO Ming-Ming,ZHANG Ying and WANG Da-Cheng.Crystallization and Preliminary Crystallographic Studies of Active TNF-α-Inducing Protein From Helicobacter Pylori[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2012,39(12):1215-1219. |
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| Authors: | GAO Ming-Ming ZHANG Ying and WANG Da-Cheng |
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| Institution: | 1)**(1) National Laboratory of Biomacromolecules,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China; 2) University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100039,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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