| 用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异 |
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| 引用本文： | 毛爱军,王台,宋艳茹.用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异[J].生物化学与生物物理进展,2001,28(5):736-739. |
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| 作者姓名： | 毛爱军 王台 宋艳茹 |
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| 作者单位： | 中国科学院植物研究所北京100093 |
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| 基金项目： | 中国科学院生物科学与生物技术特别支持费资助课题（STZ98-2-14）. |
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| 摘 要： | 通过调整差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量，优化了适用于银染检测的DDRT-PCR方法.PCR扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后，银染能检测到多而清晰的条带.泳道中的条带数最少为40个，最多达80个，平均为60个，条带大小分布在100～900 bp范围，灵敏度为5 pg/mm2 .此方法操作简便快速，灵敏度高，重复性好.采用这个改良的方法，分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异.从16 000个cDNA扩增产物条带中筛选出28个差异条带.二次PCR扩增后，进一步筛选出13个差异条带，其中7个是野生型特异表达的，6个是突变型特异表达的，为进一步认识ast突变表型的产生机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 差异显示反转录PCR 银染 拟南芥 ast突变型 |
| 收稿时间： | 2000/10/10 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2000年10月10 |
Analyzing Plant Gene Expression Differences Using a Silver Staining Based DDRT-PCR Protocol |
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| MAO Ai-Jun,WANG Tai and SONG Yan-Ru.Analyzing Plant Gene Expression Differences Using a Silver Staining Based DDRT-PCR Protocol[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2001,28(5):736-739. |
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| Authors: | MAO Ai-Jun WANG Tai and SONG Yan-Ru |
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| Institution: | Institute of Botany, The Chinese Academy of Sciences, Bejing 100093,China;Institute of Botany, The Chinese Academy of Sciences, Bejing 100093,China;Institute of Botany, The Chinese Academy of Sciences, Bejing 100093,China |
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