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PLA2R-IgG间接荧光定量免疫层析分析的构建与应用
引用本文:张艺,周颖,周衍,马骐,叶燕,殷皓,俞蕾,周彬,王春新.PLA2R-IgG间接荧光定量免疫层析分析的构建与应用[J].生物化学与生物物理进展,2022,49(9):1802-1809.
作者姓名:张艺  周颖  周衍  马骐  叶燕  殷皓  俞蕾  周彬  王春新
作者单位:1)江苏省原子医学研究所,国家卫生健康委员会核医学重点实验室,江苏省分子核医学重点实验室,无锡 214063,2)南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科,无锡 214023,1)江苏省原子医学研究所,国家卫生健康委员会核医学重点实验室,江苏省分子核医学重点实验室,无锡 214063,1)江苏省原子医学研究所,国家卫生健康委员会核医学重点实验室,江苏省分子核医学重点实验室,无锡 214063,2)南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科,无锡 214023,2)南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科,无锡 214023,2)南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科,无锡 214023,1)江苏省原子医学研究所,国家卫生健康委员会核医学重点实验室,江苏省分子核医学重点实验室,无锡 214063;3)南京医科大学原子医学教学科研基地,南京 211166,2)南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科,无锡 214023
基金项目:江苏省333工程高层次人才培养工程(PYJF201808),江苏省妇幼健康科研项目(F202033)和无锡市科技发展项目(N20202038)资助。
摘    要:目的 血清抗磷脂酶A2受体抗体IgG(PLA2R-IgG)水平是诊断和治疗特发性膜性肾病(IMN)的重要依据,而目前国内外常规检测手段主要是酶免法。为提升检测的便捷性,同时满足灵敏、宽量程分析需求,本研究构建了一种新的PLA2R-IgG检测技术。方法 采用包裹铕元素的微球示踪,对反应步骤进行选择,对微球制备液的pH、微球-抗体反应比例和反应时间优化,本文基于间接法构建了PLA2R-IgG的荧光定量免疫层析检测方法,并进行了初步临床评价。结果 本方法的灵敏度达0.7 RU/ml,标准曲线方程为y=0.771x-1.437,相关系数0.995,线性测量范围为0.7~1 500 RU/ml,回收率为86.27%~98.98%,平均批内变异系数为8.13%,交叉反应率均小于0.1%,试剂37℃储存10 d稳定。本方法与市售酶免试剂盒相关性为0.953,阴阳性判断一致,对IMN的检出率为76.9%。结论 采用两步法反应的PLA2R-IgG间接荧光定量免疫层析分析,快速、灵敏、准确,具有临床实用性。

关 键 词:抗磷脂酶A2受体抗体  免疫层析    IgG  特发性膜性肾病
收稿时间:2022/1/3 0:00:00
修稿时间:2022/8/15 0:00:00

Development and Application of an Indirect Fluorescent Immunochromatographic Assay for Quantitative Detection of PLA2R-IgG
ZHANG Yi,ZHOU Ying,ZHOU Yan,MA Qi,YE Yan,YIN Hao,YU Lei,ZHOU Bin and WANG Chun-Xin.Development and Application of an Indirect Fluorescent Immunochromatographic Assay for Quantitative Detection of PLA2R-IgG[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2022,49(9):1802-1809.
Authors:ZHANG Yi  ZHOU Ying  ZHOU Yan  MA Qi  YE Yan  YIN Hao  YU Lei  ZHOU Bin and WANG Chun-Xin
Abstract:
Keywords:anti-phospholipase A2 receptor antibody  immunochromatographic assay  europium  IgG  idiopathic membranous nephropathy
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